澤蘭源于唇形科地筍屬植物毛葉地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz. var. hirtus Ｒegel 的干燥地上部分，夏 秋二季莖葉茂盛時采割，除去雜質，曬干。具有活血調 經，袪瘀消癰，利水消腫之功。用于月經不調，經閉，痛 經，產后瘀血腹痛，瘡癰腫痛，水腫腹水，澤蘭資源豐 富，價格便宜，分布于全國大部地區(qū)。對于澤蘭多糖 的超聲提取工藝在國內外尚未見公開報道，故本研究 以澤蘭多糖的超聲提取工藝作為研究對象。

1 實驗材料

1. 1 儀器

MAPADA UV － 1800 紫 外 － 可 見 分 光 光 度 計; METTLEＲ AE240 十萬分之一精密天平( 瑞士) ; Sartorious BS224S 萬分之一精密天平 ( 北京賽多利斯公 司) ; KQ － 700DB 型數控超聲波清洗器( 昆山市超聲儀 器有限公司) ; EYELA N － 100 旋轉蒸發(fā)儀( 上海愛朗 儀器有限公司) ; SHZ － D( Ⅲ) 型循環(huán)水式多用真空泵 ( 鞏義市予華儀器有限責任公司) ; 精宏DHG-9146A 型電 熱恒溫鼓風干燥箱( 上海精宏實驗設備有限公司) ; XJA 100A 型高速粉碎機( 姜堰市銀河儀器廠) ; 京立LD25 － 2 離心機( 北京京立離心機有限公司) 。

1. 2 材料

澤蘭藥材購自鄭州市東升大藥房，經河南中醫(yī)藥 大學藥學院生藥學科董成明教授鑒定為唇形科地筍屬 植物毛葉地瓜兒苗 Lycopus lucidus Turcz var. hirtus Ｒegel 的干燥地上部分。 無水乙醇( 天津市福晨化學試劑廠) 、苯酚( 天津 市恒星化學試劑有限公司) 、硫酸( 開封市藥品化學試 劑廠) ，均為分析純。

2 實驗方法與結果

2. 1 計算方法

藥材中以葡萄糖計多糖的提取率 W = m /M × 100% ( m 為以葡萄糖計藥材中多糖的質量，M 為藥材 質量) 。

2. 2 澤蘭多糖含量測定的方法

2. 2. 1 葡萄糖標準品溶液的配制

精密稱取 105 ℃ 干燥至恒重的無水葡萄糖標準品 111. 16 mg，置 100 mL 容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度 為 1111. 6 μg /mL 的葡萄糖貯備液，備用。

2. 2. 2 標準曲線的建立

精密吸取葡萄糖貯備液 0. 5，1. 0，2. 0，4. 0，6. 0，8. 0 mL 于 100mL 容量瓶中，蒸 餾水定容，搖勻，得葡萄糖濃度分別為 5. 558、11. 116、 22. 232、44. 464、66. 969、88. 928 μg /mL 的標準溶液。 分別量取上述葡萄糖標準液與蒸餾水空白溶液 2. 0 mL 于 15 mL 試管中，分別加 1 mL 苯酚溶液、5 mL 濃 硫酸溶液振蕩搖勻，室溫反應 30 min ，蒸餾水作為空 白，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線， 得標準曲線方程為: Y = 76. 591X － 0. 0846，r = 0. 9997， 結果表明，葡萄糖濃度在 5. 558 ～ 88. 928 μg /mL 范圍 內，與吸光度線性關系良好。

2. 3 藥材粉碎的必要性考察

精密稱定未粉碎的藥材 5 份，每份 2 g。料液比 1: 30( g: mL) ，置具塞的 150 mL 的錐形瓶中，在超聲清 洗器中 25 ℃、700 W 超聲 15 min，2 次，提取液用 200 目濾網濾過合并兩次濾液。離心( 3000 r/min) 5 min， 棄去沉淀，上清液用旋轉蒸發(fā)儀濃縮至 20 mL。濃縮 液置燒杯中，把燒杯放在磁力攪拌器上，勻速快速攪 拌，緩慢加入 80 mL 無水乙醇，使溶液成 80% 的乙醇， 然后放在 4 ℃的冰箱里，靜置 1 h。離心( 3000 r/min) 5 min，用無水乙醇洗滌沉淀離心至上清液無色，沉淀 放在真空干燥箱 40 ℃，干燥至干，即得澤蘭粗多糖，稱 取澤蘭粗多糖 3 mg 左右，用蒸餾水定容在 25 mL 量瓶中，按“2. 2. 2”項下方法測其粗多糖中以葡萄糖計多 糖的含量，計算出藥材中以葡萄糖計多糖的質量。

3 討論

本實驗在優(yōu)選超聲提取澤蘭多糖工藝參數時，首 先采用的響應面的 Box － Behnken 法設計，用軟件 Design － Expert. 8. 05 進行二次多項式擬合。結果顯示， 軟件自動擬合的二次多項式方程，有多項因子對模型 的影響 P 值大于 0. 05，且失擬項的 P 值小于 0. 05，故 需要人工去因子重新擬合。可結果，進行了多個 人工擬合方案都不能達到所有因子達到對模型顯著影 響，且失擬項的 P 值一直處在小于 0. 05 的水平上，這 說明本實驗超聲提取澤蘭多糖的工藝選擇的參數值及 多糖提取率，不適合響應面法分析，對二次多項式所建 立的模型的契合度不夠。因此，本實驗采用了適應性 較強的正交實驗設計來優(yōu)化超聲提取澤蘭多糖的工 藝。



 

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